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某一质粒载体具有Tetr和Kanr的表型，在Kan抗性基因内有一Bgl Ⅰ的切点。现用Bgl Ⅰ切割该载体进行基因克隆，问：①转化后涂皿时应加什么样的抗生素？②培养后长出的菌落具有什么样的抗性基因型？③如何利用抗性变化筛选到含有插入片段的重组体？
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40.[生物——选修3：现代生物科技专题](15分)
某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHI酶切后，与用BamHI酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：
(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有______________(答出两点即可)。
而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是______________;并且______________和______________的细胞也是不能区分的，其原因是_____________。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有原因是_____________的固体培养基。
(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于_____________
A.四环素抗性，氨苄青霉素失活
B.四环素失活，氨苄青霉素抗性
C.四环素抗性，氨苄青霉素抗性
D.四环素失活，氨苄青霉素失活
在细菌质粒pBP1的四环素抗性基因tetR的中间有一个Hind Ⅲ的切点。用Hind Ⅲ切割果蝇基因组DNA，以pBP1为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆15带有果蝇的目的基因。用Hind Ⅲ和EcoR Ⅴ对克隆15进行了酶切分析，电泳结果如图Q18.1(用酶切的pBP1质粒DNA作对照)，旁边标出了片段的大小。
图Q18.1酶切电泳图谱
1～2：Hind Ⅲ切割；3～4：EcoR Ⅴ切割；5～6：Hind Ⅲ+EcoR Ⅴ；1、3、5是质粒DNA；2、4、6是15号克隆
A.小型环状双链DNA分子
B.携带有某些抗性基因
C.在细胞分裂时恒定地传给子代细胞
D.具有自我复制功能
E.获得目的基因
，则该酶识别的核苷酸序列是_________。
