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[主观题]
某一质粒载体具有Tetr和Kanr的表型,在Kan抗性基因内有一BglI的切点。现用BglI切割该载体进行基
因克隆,问:(1)转化后涂皿时应加什么样的抗生素?(2)培养后长出的菌落具有什么样的抗性基因型?(3)如何利用抗性变化筛选到含有插入片段的重组体?
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某一质粒载体具有Tetr和Kanr的表型,在Kan抗性基因内有一Bgl Ⅰ的切点。现用Bgl Ⅰ切割该载体进行基因克隆,问:①转化后涂皿时应加什么样的抗生素?②培养后长出的菌落具有什么样的抗性基因型?③如何利用抗性变化筛选到含有插入片段的重组体?
在细菌质粒pBP1的四环素抗性基因tetR的中间有一个Hind Ⅲ的切点。用Hind Ⅲ切割果蝇基因组DNA,以pBP1为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆15带有果蝇的目的基因。用Hind Ⅲ和EcoR Ⅴ对克隆15进行了酶切分析,电泳结果如图Q18.1(用酶切的pBP1质粒DNA作对照),旁边标出了片段的大小。
图Q18.1酶切电泳图谱
1~2:Hind Ⅲ切割;3~4:EcoR Ⅴ切割;5~6:Hind Ⅲ+EcoR Ⅴ;1、3、5是质粒DNA;2、4、6是15号克隆
A.四环素抗性,氨苄青霉素失活
B.四环素失活,氨苄青霉素抗性
C.四环素抗性,氨苄青霉素抗性
D.四环素失活,氨苄青霉素失活
A.AmPr和Tetr
B.ori复制子
C.LacZ标记
D.多克隆位点
A.小型环状双链DNA分子
B.携带有某些抗性基因
C.在细胞分裂时恒定地传给子代细胞
D.具有自我复制功能
E.获得目的基因
就克隆一个基因(DNA片段)来说,最简单的质粒载体也必须包括三个部分:______、______、______。另外,一个理想的质粒载体必须具有低分子质量。